Metyl da cam thường được sử dụng làm chất chỉ thị trong chuẩn độ axit vì nó chuyển rất rõ ràng từ màu đỏ ở độ pH 3,1 sang màu da cam ở độ pH 4,4. Vì sự thay đổi màu sắc diễn ra xung quanh pH của hầu hết các axit, metyl da cam thường được sử dụng để chuẩn độ axit mạnh và không dùng cho chuẩn độ bazơ.
Chuẩn độ là một kỹ thuật trong hóa học được sử dụng để tìm nồng độ của một dung dịch chưa biết. Các chất chỉ thị pH khác nhau được sử dụng trong chuẩn độ thay đổi màu sắc ở một độ pH nhất định, cho phép nhà hóa học biết khi nào phản ứng đã hoàn thành. Trong số các chất chỉ thị này có các chất chỉ thị phổ quát, phenolphtalein và metyl da cam.
Metyl da cam, cũng được sử dụng làm thuốc nhuộm dệt, được sử dụng làm chất chỉ thị trong chuẩn độ vì sự thay đổi màu sắc tươi sáng và rõ rệt của nó. Ở giá trị pH là 3,1, metyl da cam xuất hiện màu đỏ. Khi pH tăng lên 4,4, metyl da cam chuyển sang màu da cam sáng. Trong khi phenolphtalein được sử dụng để chuẩn độ bazơ và một số chuẩn độ axit, và các chất chỉ thị phổ quát có phổ biến đổi màu đầy đủ, thì metyl da cam được sử dụng đặc biệt để chuẩn độ axit vì nó có sự thay đổi màu rất rõ ràng và sắc nét với điểm cuối xác định. Cần sử dụng thiết bị an toàn thích hợp khi tiếp xúc với metyl da cam, vì nó có thể làm hỏng và gây đột biến DNA.