Dung dịch i-ốt hoạt động như một chất kết dính làm cho vết bẩn nổi rõ hơn và thuốc nhuộm màu tím pha lê trở nên liên kết chặt chẽ hơn với tế bào vi khuẩn. Thêm dung dịch i-ốt hoặc kali clorua là bước thứ hai trong quá trình quá trình nhuộm gram.
Nhuộm gram là kỹ thuật phổ biến và được sử dụng rộng rãi nhất được sử dụng để phân biệt giữa vi khuẩn gram âm và gram dương. Quá trình này dựa trên nguyên tắc vi khuẩn phản ứng khác nhau với môi trường của chúng, do đó cũng phản ứng (hoặc nhuộm màu) khác nhau, giúp xác định vi khuẩn.
Quy trình nhuộm hạt bao gồm các bước sau:
Bước 1
Vi khuẩn được xử lý bằng thuốc nhuộm tím pha lê, sau đó là dung dịch iốt.
Bước 2
Sau khi nhuộm, các chất khử màu được thêm vào mẫu vật. Điều này làm mất nước, co lại và thắt chặt lớp peptidoglycan của vi khuẩn. Các chất nhuộm màu bị giữ lại trong tế bào của vi khuẩn gram dương do lớp peptidoglycan dày hơn của nó, trong khi vi khuẩn gram âm sẽ không thể bám trên vết bẩn do lớp mỏng của nó.
Bước 3
Một dấu sao băng được thêm vào mẫu vật nhuộm nó thành màu đỏ. Màu đỏ không làm thay đổi màu tím của tế bào gram dương. Ngược lại, nó tạo thêm màu đỏ cho vi khuẩn gram âm.
