Chức năng của DNA polymerase là sao chép, đọc lại và sửa chữa DNA. Tồn tại một số DNA polymerase, nhưng DNA polymerase I, hoặc Pol I, và DNA polymerase III, hoặc Pol III, là chính những người tham gia vào quá trình sao chép DNA.
DNA polymerase chỉ bổ sung các base nucleotide khi có sẵn đoạn mồi RNA, một đoạn RNA ngắn. Các cơ sở nucleotide cho DNA bao gồm adenine, thymine, guanine và cytosine. DNA polymerase sau đó bổ sung các base nucleotide vào đoạn mồi RNA với tốc độ 1.000 base mỗi giây. DNA polymerase là một loại enzyme cực kỳ chính xác, chỉ chèn một base sai cho mỗi 10.000 base được thêm vào.
Trước khi thêm bazơ tiếp theo, DNA polymerase sẽ kiểm tra xem liệu bazơ cuối cùng được thêm vào có phải là bazơ chính xác hay không. Sự sao chép DNA không chính xác 100 phần trăm; do đó, các căn cứ không chính xác đôi khi có thể được thêm vào. DNA polymerase loại bỏ base không chính xác và thêm base đúng. Quá trình sao chép DNA cực kỳ chính xác do chức năng đọc hiệu của DNA polymerase, dẫn đến một lỗi cho mỗi 1 tỷ bazơ được thêm vào.
