Sự khác biệt giữa ELISA trực tiếp và gián tiếp là ELISA gián tiếp yêu cầu bổ sung một kháng thể thứ cấp, trong khi ELISA trực tiếp chỉ sử dụng một kháng thể chính. ELISA gián tiếp được coi là nhạy hơn khi phát hiện các chất, nhưng ELISA trực tiếp là một quy trình nhanh hơn, rẻ hơn và đòi hỏi ít bước hơn.
ELISA trực tiếp, hoặc xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzym, bắt đầu bằng việc hấp thụ kháng nguyên lên đĩa. Một protein sau đó được thêm vào để chặn tất cả các vị trí liên kết có thể có khác. Kháng thể đầu tiên được thêm vào, và nó liên kết với bất kỳ biểu mô kháng nguyên nào được công nhận. ELISA gián tiếp tiếp tục quá trình bằng cách thêm kháng thể thứ hai, kháng thể này liên kết với kháng thể đầu tiên. Kháng thể đầu tiên chỉ có sẵn nếu nó được liên kết với kháng nguyên.
Cả hai quy trình đều yêu cầu nhiều lần rửa trong phòng thí nghiệm để loại bỏ các chất bổ sung. Quá trình ELISA rất quan trọng trong phòng thí nghiệm vì nó cho phép các nhà khoa học xác định các kháng nguyên. Đây là một cách phổ biến và đáng tin cậy để kiểm tra bệnh tật và chất gây dị ứng thực phẩm.
ELISA gián tiếp có thể phát hiện một lượng nhỏ kháng nguyên và nó cho phép một kháng thể thứ cấp duy nhất được sử dụng với rất nhiều kháng thể chính khác nhau. ELISA trực tiếp yêu cầu lượng kháng nguyên cao hơn để phát hiện và không linh hoạt bằng vì chỉ sử dụng một kháng thể.
