Kính hiển vi một tiêu cự duy trì tiêu điểm trong suốt các lần thay đổi độ phóng đại theo thời gian thực. Các kính hiển vi này cũng duy trì tiêu điểm khi người dùng xoay vật kính. Khả năng này là một chức năng của thấu kính và là một tính năng đặc biệt phổ biến trên kính hiển vi hiện trường. Ống kính Parfocal cũng xuất hiện trên các máy ảnh kỹ thuật số chất lượng cao.
Tiêu điểm của kính hiển vi một tiêu vẫn rõ nét khi độ phóng đại thay đổi theo một trong hai hướng. Celestron giải thích rằng cách nhanh nhất để xác định xem kính hiển vi có thấu kính một tiêu hay không là tải vật kính, định vị bản chiếu của mẫu vật và đặt kính hiển vi ở cài đặt phóng đại mạnh nhất. Lấy nét hình ảnh và giảm độ phóng đại. Nếu hình ảnh mẫu vật vẫn được lấy nét, kính hiển vi là tiêu điểm.
Celestron tuyên bố rằng nhiều kính hiển vi một tiêu cũng được phân tâm, có nghĩa là các vật kính quay và đổi chỗ vẫn ở hoặc gần trung tâm của trường tầm nhìn. Tính năng tiện lợi này giúp giảm thời gian dành cho việc xác định vị trí và tinh chỉnh các mục tiêu, đồng thời mang lại cho người dùng nhiều thời gian hơn để xem các mẫu vật.
Kính hiển vi một tiêu cự giúp giảm mài mòn các bộ phận cơ khí và có giá trị trong các lớp học vì chúng giúp nhiều người dùng xem liên tiếp cùng một mẫu dễ dàng hơn. Kính hiển vi có tiêu cự và phân vùng cũng làm giảm nguy cơ vô tình nhìn thấy các cấu trúc không liên quan do sai số phóng đại. Điều này đặc biệt quan trọng trong các phòng thí nghiệm y tế và các môi trường khác mà cuộc sống phụ thuộc vào độ chính xác của khoa học.
