Tính đặc hiệu của enzym đề cập đến xu hướng các enzym xúc tác một loạt phản ứng hóa học cụ thể. Theo giải thích của Worthington Biochemical Corporation, một số enzym hoàn toàn đặc hiệu và chỉ xúc tác cho một phản ứng hóa học. Các enzym khác thể hiện tính đặc hiệu của nhóm và chỉ hoạt động trên các phân tử có các nhóm chức năng nhất định, chẳng hạn như nhóm amin. Các enzym đặc hiệu liên kết hoạt động trên các liên kết đặc biệt, trong khi các enzym đặc hiệu lập thể hoạt động trên các đồng phân steric hoặc quang học.
Theo một nghiên cứu năm 2010 được xuất bản trong Bách khoa toàn thư về Khoa học Đời sống, tính đặc hiệu xuất hiện nhờ cấu trúc ba chiều của vị trí mà tại đó enzym liên kết với cơ chất đích. Bằng cách này, các enzym chỉ liên kết với một loạt các phản ứng hóa học nhất định. Một số enzyme bao gồm cấu trúc thứ cấp phù hợp với cơ chất hóa học và có chức năng như một trình hiệu đính, điều này đảm bảo thêm tính đặc hiệu của enzyme. Một số enzym xúc tác nhiều loại cơ chất hóa học hoạt động khác nhau tùy thuộc vào cơ chất mà chúng liên kết với nhau. Ví dụ: khi một enzym liên kết với cơ chất ưu tiên, thì enzym có thể phù hợp với cơ chất hoàn toàn hơn so với nếu nó liên kết với cơ chất không ưa thích.
Nghiên cứu của Bách khoa toàn thư về Khoa học Đời sống năm 2010 giải thích rằng tính cụ thể không phải lúc nào cũng tuyệt đối. Theo thời gian, các enzym mới phát triển từ các tương tác với các phản ứng hóa học thay thế.
