Thử nghiệm citrate xác định xem vi khuẩn có thể phát triển hay không bằng cách sử dụng citrate làm nguồn năng lượng và carbon duy nhất của nó. Nếu vi sinh phát triển trên thạch Simmons citrate, nó sẽ vượt qua thử nghiệm.
Theo các nhà sản xuất của VirtualUnknown Microbiology, việc sử dụng citrate làm tăng độ pH do các sản phẩm phụ có tính kiềm tích tụ trong vi sinh vật. Môi trường thạch nghiêng Simmons citrate được sử dụng. Nó chứa natri xitrat và muối khoáng cung cấp cacbon, và nó chứa amoni photphat như một nguồn nitơ. Chất chỉ thị pH được sử dụng để thử nghiệm là brom thymol blue. Khi độ pH trung tính, màu chuyển sang xanh lục, màu vàng có nghĩa là độ pH có tính axit và màu xanh lam là độ pH có tính kiềm.