Phenolphtalein là một axit yếu được sử dụng trong chuẩn độ để cung cấp dấu hiệu trực quan về điểm cân bằng giữa nồng độ của số mol axit và số mol của bazơ. Phenolphtalein không màu khi ở trong dung dịch axit và có màu hồng khi ở trong một giải pháp cơ bản.
Khi thực hiện chuẩn độ, người ta dùng pipet định lượng một thể tích cụ thể của dung dịch chưa biết nồng độ vào bình cầu. Một vài giọt phenolphtalein được thêm vào để xác định xem dung dịch có tính axit hay bazơ. Nếu dung dịch chuyển sang màu hồng là bazơ. Nếu nó vẫn trong, nó có tính axit. Thanh khuấy và đĩa được sử dụng trong suốt quá trình chuẩn độ để duy trì dung dịch đồng nhất. Để chuẩn độ dung dịch axit, dung dịch bazơ với nồng độ đã biết được thêm vào buret định mức. Khối lượng bắt đầu được ghi nhận. Từ từ, mở buret và quan sát thấy dung dịch. Khi xuất hiện các vệt màu hồng nhạt, tốc độ dòng chảy bị giảm. Toàn bộ dung dịch sẽ chuyển sang màu hồng trước khi nhấp nháy trở lại trong suốt. Tại thời điểm này nên đóng buret. Các lần bổ sung thể tích tiếp theo được thực hiện từng giọt một và đầu buret được tráng bằng nước giữa các giọt để đảm bảo rằng tất cả số mol bazơ đã được thêm vào. Khi khuấy dung dịch chuyển sang màu hồng và vẫn còn màu hồng, thể tích cuối cùng được ghi lại.Thể tích ban đầu được trừ đi thể tích cuối cùng để xác định tổng thể tích được đưa vào bình. Nồng độ chưa biết (M1) được xác định bằng cách sử dụng phương trình pha loãng: (M1) (V1) = (M2) (V2), trong đó V1 là thể tích pipet ban đầu, M2 là nồng độ mol của dung dịch cơ bản và V2 là tổng thể tích đã biết được sử dụng trong phép chuẩn độ.