Đại học Wageningen giải thích rằng các bazơ DNA chỉ bắt cặp với một bazơ khác, do đó, trình tự DNA bổ sung có thể được đọc ra bằng cách thay thế mỗi bazơ bằng phần bổ sung của nó và đảo ngược thứ tự. Các cặp bazơ bổ sung là A. thành T và G thành C, vì vậy mọi G được thay thế bằng C, v.v.
Sự đảo ngược của trình tự DNA bổ sung là một vấn đề của quy ước. Trình tự DNA được viết từ đầu 5 '("năm nguyên tố") đến 3' ("ba số nguyên tố"), nhưng nếu trình tự bổ sung được viết ngược lại với trình tự DNA ban đầu, thì nó sẽ chạy từ đầu 3 'đến 5'.
Kỹ thuật này cũng có thể được sử dụng để xác định mRNA được phiên mã từ một đoạn DNA mã hóa cụ thể. Sự khác biệt duy nhất là khi viết một chuỗi RNA, T, thymine, được thay thế bằng U, uracil. Thông thường, trình tự RNA giống với chuỗi mã hóa hay "cảm giác" của DNA, ngoại trừ U thay vì các base T.
DNA bổ sung, hoặc cDNA, cũng có thể đề cập đến một chuỗi DNA được tổng hợp dựa trên trình tự mRNA đã bị loại bỏ khỏi tế bào hoặc sinh vật. Quá trình tổng hợp cDNA từ mRNA được sử dụng trong kỹ thuật sinh học phân tử để cho phép chỉ hoạt động với DNA mã hóa chuỗi protein, thay vì phần intron của protein.
