Về vi sinh vật học, nuôi cấy thuần khiết là nuôi cấy trong phòng thí nghiệm có chứa một loài sinh vật duy nhất, theo Encyclopædia Britannica. Nuôi cấy thuần khiết thường có nguồn gốc từ nuôi hỗn hợp.
Nền văn hóa hỗn hợp là nền văn hóa có nhiều loài. Môi trường nuôi cấy tinh khiết có nguồn gốc từ nuôi cấy hỗn hợp bằng cách chuyển một mẫu nhỏ vào môi trường phát triển vô trùng mới theo cách phân tán các tế bào riêng lẻ trên bề mặt môi trường. Nó cũng có thể được tạo ra bằng cách làm mỏng ống góp mẫu trước khi cấy môi trường mới. Cả hai phương pháp tách các tế bào riêng lẻ để khi các tế bào nhân lên, mỗi tế bào tạo thành một khuẩn lạc rời rạc. Sau đó, các tế bào này có thể được sử dụng để cấy vào nhiều môi trường hơn với sự đảm bảo rằng chỉ có một loại sinh vật.
