Đường không tạo ra kết quả dương tính trong thử nghiệm lên men. Lên men là quá trình trong đó đường được chuyển đổi thành một sản phẩm hóa học khác. Trong một thử nghiệm lên men, các loại đường cụ thể được sử dụng để xác định sự hiện diện của vi khuẩn. Kết quả dương tính sẽ là sự hình thành axit, khí hoặc rượu.
Các loại đường được sử dụng trong thử nghiệm lên men được lựa chọn cụ thể dựa trên các sản phẩm mà chúng trở thành và loại vi khuẩn nào dẫn đến kết quả đó. Ví dụ, thạch muối mannitol tiêu diệt hầu hết các vi khuẩn ngoại trừ vi khuẩn Staphylococcus kháng muối. Chỉ một số chủng Staphylococcus phản ứng với mannitol trong thạch, chẳng hạn như Staphylococcus aureus, tạo ra các sản phẩm phụ có tính axit. Thạch muối mannitol có chỉ thị pH màu đỏ chuyển sang màu vàng khi có nồng độ axit cao hơn để biểu thị phản ứng này.
Các thử nghiệm lên men được thực hiện trong các môi trường khác nhau tùy thuộc vào kết quả mong muốn và vi khuẩn được thử nghiệm. Hai môi trường phổ biến nhất là nước dùng và thạch. Agar là một hợp chất giống như thạch được sản xuất từ rong biển cho phép hầu hết vi khuẩn phát triển trên bề mặt của nó, và nó có thể được truyền vào với nhiều chất dinh dưỡng và hóa chất khác nhau. Nước dùng được tạo thành từ các dung dịch hóa chất. Phương tiện hạn chế một số loại tăng trưởng được gọi là có chọn lọc. Phương tiện thể hiện sự thay đổi vật lý và được sử dụng để thử nghiệm cho một số sản phẩm nhất định được gọi là sự khác biệt. Các môi trường khác biệt này là cơ sở cho nhiều thử nghiệm khẳng định, bao gồm cả thử nghiệm lên men.