Tinh trùng được tạo ra trong tinh hoàn của nam giới thông qua một quá trình gọi là quá trình sinh tinh, quá trình này phát triển các tế bào chưa trưởng thành được gọi là sinh tinh thành các tế bào sinh tinh trưởng thành hoàn toàn được gọi là ống sinh tinh. Quá trình này bắt đầu trong các ống bán lá kim, nơi các ống sinh tinh trải qua một quá trình được gọi là nguyên phân. Trong giai đoạn cuối cùng của quá trình trưởng thành, được gọi là sinh tinh, tế bào tinh trùng dài ra, mọc đuôi và xoay để đuôi của nó hướng vào bên trong ống.
Trong quá trình trưởng thành, phần đầu của tinh trùng phát triển một nắp gọi là acrosome, giúp nó phá vỡ thành của trứng cái trong quá trình thụ tinh. Đuôi đẩy tinh trùng bằng chuyển động nhấp nhô. Khi tinh trùng đã trưởng thành hoàn toàn, nó sẽ đi qua các ống sinh tinh và được lưu trữ trong mào tinh hoàn cho đến khi rời khỏi cơ thể trong quá trình xuất tinh.
Từ khi bắt đầu quá trình cho đến khi kết thúc, mất khoảng 70 ngày để tạo ra tinh trùng. Con trai bắt đầu sản xuất tinh trùng khi bước qua tuổi dậy thì. Tinh trùng được sản xuất liên tục ở nam giới, không giống như phụ nữ chỉ rụng trứng một lần mỗi tháng. Ở nam giới con người có hệ thống sinh sản bình thường, mỗi lần xuất tinh chứa khoảng 200 đến 300 triệu tinh trùng. Ngoài tinh trùng, tinh dịch xuất ra còn chứa một số chất lỏng khác, bao gồm dịch tiết từ túi tinh, tuyến Cowper và tuyến tiền liệt.
