Enzyme DNA helicase mạnh mẽ sẽ tháo các sợi kép của DNA bằng cách phá vỡ các liên kết giữa mỗi base bổ sung. Các bazơ này được liên kết với nhau bằng các liên kết hydro mạnh, nhưng khi phá vỡ các liên kết này, DNA helicase tạo ra hai phân tử DNA sợi đơn.
DNA helicase tự gắn vào phân tử DNA tại nơi được gọi là nguồn gốc của quá trình sao chép để bắt đầu quá trình sao chép DNA. Helicase hoạt động như một loại nêm "giải nén" phân tử DNA sợi đôi thành một ngã ba hình chữ Y được gọi là ngã ba sao chép. Vào thời điểm vi khuẩn helicase đi đến cuối sợi DNA, di chuyển ngã ba sao chép theo đường đi của nó, sẽ có hai sợi DNA đơn và quá trình sao chép đang được tiến hành.
