Cá mập hổ tồn tại ở đầu chuỗi thức ăn và chúng săn mồi nhiều loài, bao gồm cá, rùa biển và các loài cá mập khác. Ngoài ra, cá mập hổ săn mồi các loài chim sống ở biển, bắt chúng khi chúng hạ cánh trên mặt nước. Các loài nhuyễn thể như ốc biển, ốc xà cừ và váng sữa cũng là con mồi cho những con cá mập cơ hội. Cá mập hổ cũng là loài ăn xác thối từng được biết đến là loài ăn rác.
Theo Dự án Nghiên cứu Hệ sinh thái Vịnh Shark, cá mập hổ có vai trò quan trọng trong việc điều chỉnh dân số của nhiều loài nhỏ có chung môi trường sống. Điều này bao gồm những loài mà cá mập hổ săn, cũng như những loài mà chúng hiếm khi ăn. Điều này xảy ra bởi vì các loài không phải là con mồi vẫn phải tránh những con cá mập hổ rình mồi; vì điều này, chúng không thể kiếm thức ăn thường xuyên. Điều này khiến những loài này khó sinh trưởng, phát triển và sinh sản thành công.
Mặc dù cá mập hổ hiếm khi tấn công con người, nhưng chúng chỉ đứng sau cá mập trắng lớn về các vụ tấn công người được báo cáo. Ở Hawaii, nơi thường có cá mập hổ, trung bình có một vụ tấn công con người mỗi năm, theo Dự án Nghiên cứu Hệ sinh thái Vịnh Shark.
Mặc dù cá mập hổ là động vật săn mồi ở đỉnh, nhưng chúng thường bị con người bắt và ăn thịt.
Con mồi cụ thể của cá mập hổ thường thay đổi từ vị trí này sang vị trí tiếp theo. Ở một số khu vực, rắn biển là loài săn mồi phổ biến, trong khi cá nược lại là con mồi quan trọng ở các khu vực khác. Cá mập hổ đã được gọi là? Thùng rác? của biển, dựa trên sở thích ăn những món kỳ lạ của họ. Ủng cao su, mũ sắt, túi than, áo mưa, túi xách và những thứ kỳ lạ khác thường được tìm thấy ở những con cá mập? bao tử. Một con cá mập hổ thậm chí còn chứa một bộ giáp trong bụng.
Cá mập hổ đứng đầu chuỗi thức ăn trong các khu vực nghiên cứu địa phương của chúng. Bởi vì tác động của chúng đối với hệ sinh thái là lớn không cân xứng với tỷ lệ phổ biến của chúng, các nhà khoa học coi cá mập hổ là loài chủ chốt. Điều này có nghĩa là cá mập hổ giúp điều chỉnh toàn bộ môi trường sống bằng cách kiểm soát các quần thể loài săn mồi. Nếu không có cá mập để tiêu thụ nhiều loài cá nhỏ này, cá sẽ tiêu thụ quá nhiều tài nguyên từ môi trường sống, điều này có thể khiến hệ sinh thái địa phương bị sụp đổ.
