Các thành phần chính trong mực tô sáng là nước và dung môi glycol. Khoảng 5% mực là bột màu hoặc thuốc nhuộm huỳnh quang. Một số loại kem đánh dấu cũng chứa một lượng nhỏ chất diệt khuẩn để ngăn chặn sự phát triển của nấm và vi khuẩn.
Thuốc nhuộm được sử dụng trong bút đánh dấu màu vàng có gốc pyrene. Bút đánh dấu màu xanh lam chứa thuốc nhuộm triphenylmethane. Thuốc nhuộm Triphenylmethane kết hợp với pyranine tạo ra mực làm nổi bật màu xanh lá cây. Bút đánh dấu màu hồng có chứa rhodamine. Bút đánh dấu màu tím được làm bằng rhodamine trộn với triphenylmethane. Xanthene kết hợp với coumarin tạo ra mực tô sáng màu tím.
Các phân tử hóa học trong mực đánh dấu hấp thụ ánh sáng cực tím. Điều này "kích thích" các electron bên trong các phân tử, sau đó giải phóng một dạng sóng dài hơn một chút của ánh sáng. Sự tương tác giữa ánh sáng và hóa chất này được mắt hiểu là huỳnh quang.
