Máy đo màu hoạt động bằng cách chiếu ánh sáng vào mẫu và đo lượng ánh sáng rời đi; Sau đó, con số này được so sánh với lượng đối chứng tiêu chuẩn. Thuốc thử đã biết được đưa vào mẫu và màu sắc phát triển do thuốc thử được sử dụng để xác định sự truyền ánh sáng của mẫu.
Máy đo màu đo độ truyền ánh sáng theo đơn vị độ hấp thụ hoặc độ truyền phần trăm. Máy đo màu tuân theo Định luật Bia để cung cấp các đơn vị đo độ hấp thụ. Định luật Bia là một phương trình hóa học dùng để đo độ hấp thụ của mẫu bằng cách xem xét lượng ánh sáng đi vào và đi ra, độ hấp thụ và độ cong của vật chứa mẫu.