Người Iroquois được tạo thành từ năm bộ tộc khác nhau định cư quanh vùng ngoại ô New York cách đây 4.000 năm; Liên minh Iroquois của Năm quốc gia này bao gồm Seneca, Mohawk, Oneida, Cayuga và Onondaga. Ngôn ngữ Iroquois là yếu tố chung chính thống nhất các bộ lạc này. Đế chế Iroquois đạt đến đỉnh cao vào năm 1680; nó bị thu hẹp sau cuộc Cách mạng Hoa Kỳ vì các bộ lạc đã đứng về phía quân Anh bại trận. Ngày nay, nhiều người Seneca, Tuscarora và Onondaga tiếp tục sống ở New York.
Lãnh thổ Iroquois ban đầu nằm giữa Dãy núi Adirondack và Thác Niagara trước khi mở rộng ra bao gồm các phần của Michigan, Kentucky, Quebec và New England. Năm 1712, bộ tộc Tuscarora gia nhập Liên minh miền Nam, tổ chức này lấy tên là Haudenosaunee, hay "sáu quốc gia", để phản ánh sự thay đổi. Các lực lượng Mỹ xâm lược lãnh thổ Iroquois vào năm 1779, dẫn đến việc nhiều người Iroquois bị đẩy lên phía bắc vào lãnh thổ Canada.
Trong những thập kỷ đầu của những năm 1800, một phần lớn các vùng đất Iroquois nguyên thủy đã được nhượng lại cho Hoa Kỳ. Tuy nhiên, không giống như người Cherokee, các bộ tộc Iroquois đã tìm mọi cách để ở lại lãnh thổ quê hương của họ. Bộ lạc Cayuga di cư đến Ohio, và sau đó chuyển đến Lãnh thổ Da đỏ ở Oklahoma. Sau đó, họ được các thành viên của bộ lạc Seneca gia nhập và thành lập Bộ lạc Seneca-Cayuga ở Oklahoma.
Người Iroquois nổi tiếng là những nhà ngoại giao giỏi và những chiến binh đã thành công trong việc giải quyết các vấn đề cùng nhau. Vào những năm 1640, các bộ lạc có được súng cầm tay của Hà Lan, giúp họ dễ dàng chinh phục các bộ lạc khác. Các tù nhân trở thành một phần của bộ tộc đã bắt giữ họ, điều này đã củng cố mối quan hệ gia đình giữa các nhóm. Các nhà lãnh đạo của mỗi bộ tộc đã đàm phán chính trị thông qua một hệ thống phức tạp tương tự như luật pháp hiện đại của Mỹ và châu Âu. Người Iroquois thờ một vị thần tên là Tarachiawagon và duy trì trật tự thông qua hợp tác và tôn trọng lẫn nhau.