Cột C18 được sử dụng trong sắc ký lỏng hiệu năng cao, hoặc HPLC, để tách các thành phần của hỗn hợp hóa chất hòa tan bằng sự khác biệt về độ phân cực của chúng. Cột C18 có chuỗi 18 cacbon gắn với các hạt silica trên thành cột.
Cột C18 được sử dụng trong sắc ký pha đảo ngược, trong đó môi trường của cột là không phân cực và pha động (chất lỏng mà hóa chất được hòa tan vào) là phân cực. C18 là cột pha đảo ngược được sử dụng phổ biến nhất và sắc ký pha đảo ngược là kỹ thuật HPLC được sử dụng phổ biến nhất. Các loại cột pha đảo ngược phổ biến khác là C8, phenyl và silica tinh khiết không kèm theo bất kỳ nhóm hóa chất nào khác.