Jamestown nằm ở phía đông Virginia trên bờ sông James. Thuộc địa ban đầu, được thành lập vào ngày 14 tháng 5 năm 1607, mở rộng ra ngoài pháo đài ban đầu thành một ngôi làng có tên là New Towne vào năm 1610 sau bốn năm gian khổ và bệnh tật làm rung chuyển dân số.
Khi được thành lập, thuộc địa được gọi là James Forte, James Towne và James Cittie. Pháo đài bằng gỗ hình tam giác ban đầu bao quanh những ngôi nhà nhỏ, một nhà thờ và một kho vũ khí. Khoảng 40 thành viên thủy thủ đoàn và 100 người định cư đã thành lập thuộc địa đầu tiên, nhưng trong vòng ba năm, phần lớn thủy thủ đoàn trở về Anh, và phần lớn những người định cư đã chết. Vào năm 1610, thêm 150 người định cư đến với nguồn cung cấp mới giống như những người định cư ban đầu coi như từ bỏ pháo đài.