Dơi giao tiếp với nhau thông qua định vị bằng tiếng vang, sử dụng âm thanh tần số rất cao. Sử dụng âm thanh cho phép dơi hình dung các vật thể có kích thước bất kỳ trong môi trường của chúng.
Dơi tạo ra âm thanh bằng miệng, nhưng một số loài dơi tạo ra âm thanh qua mũi. Đôi tai nhạy cảm của chúng thu nhận âm thanh phản xạ từ các vật thể xung quanh. Họ dựa vào định vị bằng tiếng vang không chỉ để liên lạc mà còn cả điều hướng. Định vị bằng tiếng vang cho phép họ nhận ra kích thước của bất kỳ đối tượng nào.
Dơi cũng có thể xác định khoảng cách của mọi thứ dựa trên thời gian để âm thanh phản xạ đến tai chúng. Dơi phát ra âm thanh cực lớn liên tiếp, dao động từ tần số cao đến tần số thấp. Điều này giúp chúng dễ dàng xác định và tóm gọn những con mồi ở gần và tránh chướng ngại vật cản đường.
Dơi tạo ra một tốc độ đáng kinh ngạc 200 xung mỗi giây ở tần số cực cao mà tai người hầu như không nghe được. Phạm vi thính giác của con người là khoảng 20 hertz đến 15 đến 20 kilohertz, tùy thuộc vào độ tuổi. Ngược lại, dơi có khả năng nghe âm thanh có tần số lên tới 110 kilohertz.
Hơn 800 loài dơi sử dụng các kiểu tần suất khác nhau. Các loài dơi khác nhau sử dụng các dải tần số cụ thể tùy theo môi trường xung quanh và loại con mồi. Các nhà khoa học có thể xác định nhiều loài khác nhau bằng cách nghe âm thanh của dơi bằng máy dò dơi.