Mặc dù không có dơi sống nào bị mù hoàn toàn, nhưng hầu hết các loài dơi đều dựa vào âm thanh để tìm con mồi vào ban đêm. Được gọi là định vị bằng tiếng vang, âm thanh siêu âm do dơi phát ra từ các vật thể khác phát ra. Bằng cách nghe thấy những tiếng vọng này từ các vật thể xung quanh, dơi có thể tạo ra một bản đồ bên trong cho phép chúng định hướng và nắm bắt thức ăn.
Hầu hết các loài dơi ăn côn trùng hoặc động vật có xương sống nhỏ rất thích hợp để tìm kiếm bằng khả năng định vị bằng tiếng vang. Một số loài dơi bắt vô số côn trùng nhỏ khi đang bay, trong khi những con khác săn côn trùng lớn ẩn nấp giữa các tảng đá và thảm thực vật. Một số loài dơi, chủ yếu có nguồn gốc từ châu Phi và châu Á, sống nhờ trái cây hoặc phấn hoa hơn là côn trùng. Những con dơi ăn trái cây và mật hoa thường sử dụng các giác quan của thị giác và khứu giác để tìm con mồi và chúng có thể hoạt động trước khi bóng tối buông xuống.
Những con dơi dựa vào khả năng định vị bằng tiếng vang thường có các vạt da và nếp gấp trên mặt. Mặc dù các nhà khoa học vẫn chưa hiểu hết chức năng của chúng, nhưng có khả năng những cánh và nếp gấp này hỗ trợ việc phát hiện âm thanh do định vị bằng tiếng vang. Dơi tạo ra khả năng định vị bằng tiếng vang qua mũi hoặc miệng của chúng. Ngoài âm thanh siêu âm liên quan đến định vị bằng tiếng vang, dơi còn phát ra nhiều loại âm thanh khác nhau nằm trong phạm vi nghe của con người.