Hầu hết các loài dơi sử dụng âm thanh hoặc sonar sinh học, được gọi là định vị bằng tiếng vang, để điều hướng. Dơi phát ra âm thanh dội lại như tiếng vang và cho phép chúng phát hiện chướng ngại vật trên đường đi của chúng, xác định vị trí của dơi và tìm thức ăn.
Có hơn 900 loài dơi và hầu hết chúng sử dụng các đặc điểm vật lý khác nhau, chẳng hạn như tai giống cái loa và sóng siêu âm, làm cơ chế hướng dẫn chính của chúng. Dơi sử dụng giọng nói, lỗ mũi hoặc lưỡi của chúng để phát ra âm thanh siêu âm trong dải tần từ 20 đến 200 kilohertz (Khz). Con người không thể nghe thấy âm thanh của loài dơi vì thính giác của con người đạt đỉnh khoảng 20 Khz. Đó là một âm thanh lớn từ 50 đến 120 decibel, giống như một chiếc chuông báo động khói phát ra cách tai bạn khoảng 4 inch.
Tạp chí Scientific American báo cáo rằng các cuộc gọi định vị bằng tiếng vang được đặc trưng bởi cường độ (mức decibel), tần số và thời gian chúng kéo dài. Hầu hết các loài dơi sử dụng kết hợp âm thanh định vị tần số thấp và cao để cho chúng biết kích thước, phạm vi, vị trí, tốc độ và hướng bay của con mồi. Não và tai của dơi cực kỳ nhạy cảm với sự thay đổi tần số và có thể bắt côn trùng cách xa một mét trong khoảng sáu mili giây. Các kích thước, hình dạng, nếp gấp và nếp nhăn khác nhau ở tai của dơi được cho là một phần quan trọng trong khả năng phát hiện và bắt mồi của dơi.