Thủ đô của Guatemala là Thành phố Guatemala, còn được gọi là Ciudad de Guatemala hoặc Guatemala de la Asuncion. Thành phố Guatemala được thành lập vào năm 1776 để thay thế thủ đô cũ là Antigua Guatemala.
Thành phố Guatemala là trung tâm chính trị, thương mại và văn hóa của Guatemala. Nó tồn tại dưới một số chính quyền, bao gồm Đế chế Mexico của Agustin de Iturbide, Liên bang Trung Mỹ và Cộng hòa Guatemala. Ngoài vai trò là trụ sở chính phủ, Thành phố Guatemala còn chịu trách nhiệm tạo ra hơn 50% tổng sản lượng kinh tế của đất nước. Một số địa danh nổi tiếng của nó là Bảo tàng Khảo cổ học Quốc gia, Đại học San Carlos Guatemala, Thành phố Olympic và các nhà thờ Santo Domingo và San Francisco.