Sư tử, giống như các động vật có vú khác, đi tiểu qua bộ phận sinh dục của chúng, thông qua một ống dẫn từ bàng quang của chúng ra thế giới bên ngoài. Hệ thống tiết niệu của sư tử cũng giống như các loài mèo khác, ở chỗ chúng sử dụng nước tiểu để loại bỏ chất thải và giao tiếp thông qua tia phun.
Tất cả các loài động vật có vú đều có cấu tạo giải phẫu cơ bản giống nhau về khả năng đi tiểu. Thận lọc chất thải từ máu thông qua một hệ thống phức tạp của các ống. Sau đó, một ống được gọi là niệu quản vận chuyển chất lỏng đã được thận xử lý vào bàng quang, nơi nó được lưu trữ.
Ở sư tử và hổ, nước tiểu được lưu trữ trong bàng quang cũng chứa các chất béo có mùi giúp đánh dấu lãnh thổ. Tất cả các loài mèo đều tham gia vào hoạt động đánh dấu bằng vòi xịt, một kiểu đi tiểu mà chất lỏng được phun ra bên ngoài để giành lấy lãnh thổ bằng các dấu hiệu mùi hương. Con đực tham gia đánh dấu bằng vòi xịt thường xuyên hơn con cái, nhưng cả hai đều được biết là làm điều đó khi được 2 tuổi.
Cũng như các loài động vật có vú khác, nước tiểu sư tử đi từ bàng quang ra ngoài qua niệu đạo, một ống chạy qua âm hộ hoặc dương vật.