Khoảng 102 người đã tham dự Lễ tạ ơn đầu tiên. Năm mươi hai Người hành hương đã ở đó, bao gồm John Alden, Miles Standish và William Bradford. Khoảng 50 người Mỹ bản địa từ bộ lạc Wampanoag cũng tham dự, bao gồm cả Massasoit và Squanto, những người đóng vai trò phiên dịch giữa hai nhóm.
Lễ Tạ ơn đầu tiên là một sự kiện kéo dài ba ngày. Ngày chính xác vẫn còn là một bí ẩn, nhưng nó diễn ra vào năm 1621 trong khoảng thời gian từ ngày 21 tháng 9 đến ngày 9 tháng 11. Không rõ chính xác những món ăn nào được phục vụ, nhưng theo lời kể của Edward Winslow, một trong những người tham dự, thực đơn bao gồm thủy cầm, gà tây, thịt nai, ngô và lúa mạch, với những người khai hoang cung cấp thủy cầm và loài Wampanoags cung cấp năm con nai.
