Kẻ thù của Julius Caesar đã thay đổi trong suốt cuộc đời của ông. Những kẻ thù đáng chú ý nhất vào thời điểm ông qua đời vào năm 44 trước Công nguyên. là Marcus Junius Brutus (người phát biểu trong cuốn "Et tu, Brute?" nổi tiếng của Shakespeare) và Gaius Cassius Longinus.
Caesar ký một hiệp ước với người bạn lâu năm Gnaius Pompeius Magnus (Pompey) và Marcus Licinius Crassus vào năm 60 trước Công nguyên. Đây được biết đến với tên gọi là Bộ ba đầu tiên, và nó chỉ kéo dài cho đến đầu những năm 50 trước Công nguyên. Pompey dần quay lưng lại với Caesar sau khi Tam hùng tan rã.
Khi Caesar vượt qua Rubicon (nguồn gốc của cụm từ "iacta alia est," hoặc "chết được đúc"), ông đã gây ra nhiều kẻ thù; một phần lớn của Thượng viện đã khiển trách anh ta vì đã vượt sông. Sự bất đồng giữa những người ủng hộ và chống Caesarians bắt đầu cuộc Nội chiến. Pompey chạy trốn khỏi Rome vào thời điểm này, vì sợ rằng Caesar là kẻ thù quá mạnh.
Cato the Younger trở thành kẻ thù của Caesar trong Nội chiến. Cato tin tưởng vào một quy tắc đạo đức nghiêm ngặt và tính nghiêm minh của xã hội, trong khi Caesar lên tiếng ủng hộ những cải cách xã hội và một hệ thống chính phủ mới nhằm chuyển quyền lực khỏi viện nguyên lão. Cato chạy trốn khỏi Caesar và cuối cùng tự sát vì sợ hệ thống chính trị mới của Caesar và không muốn được kẻ thù ân xá.
Brutus là kẻ thù nổi tiếng nhất của Caesar. Trước đây là đồng minh thân cận của Caesar, Brutus bí mật từ chối anh ta và được cho là đã bắt đầu cuộc tấn công chí mạng nhằm vào Caesar vào Ides of March (ngày 15 tháng 3 năm 44 trước Công nguyên).
