Theo Chương trình Chăm sóc và Sử dụng Động vật tại Đại học Duke, khử trùng lạnh sử dụng chất khử trùng bằng hóa chất lạnh để khử trùng nhiều vật dụng. Cũng như các phương pháp khử trùng khác, khử trùng lạnh khác với khử trùng. Không giống như khử trùng, khử trùng tiêu diệt tất cả các vi sinh vật sống sót.
Chương trình Chăm sóc và Sử dụng Động vật tại Đại học Duke sử dụng phương pháp khử trùng lạnh đối với một số vật dụng có bề mặt nhẵn có thể tiếp xúc với chất khử trùng bằng hóa chất. Các quy trình phẫu thuật sinh tồn trên bất kỳ động vật có vú nào đều yêu cầu sử dụng các dụng cụ và vật tư vô trùng, làm cho các chất khử trùng như cồn và amoni bậc bốn không phù hợp. Trong khi nhiều mặt hàng được bán trên thị trường dưới dạng gói tiệt trùng, những mặt hàng khác thường yêu cầu tiệt trùng.
Tiệt trùng lạnh có hiệu quả đối với nhiều mặt hàng, nhưng hơi nước áp suất cao hoặc nhiệt độ và khí etylen oxit vẫn là những phương pháp được ưu tiên. Ethylene oxide được sử dụng trên các vật dụng không có khả năng chịu nhiệt độ cao.